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基因枪操作规程

基因枪操作规程

 

一、 实验耗材的处理

  1. 基因枪所处的位置及超净工作台用紫外灯灭菌1.5h.

  2. 70%乙醇对基因枪表面以及样品室进行消毒,同时用70%乙醇将阻拦网、固定器浸泡15min,对可裂膜用70%异丙醇浸泡一下,不要超过3s,微弹载体用70%乙醇浸泡一下放在超净工作台上阴干。

二、 基因枪轰击步骤

  1. 取微粒载体,用厂家提供的嵌入工具将其固定在钢碗底部环内,取DNA与金粉混合物,吸取一定量加于微载体中央,干燥2min

  2. 安装可裂膜于其托座上,顺时针安到加速器上,用厂家提供的专用扳手适当用力固定。

  3. 将空间环、阻挡网、阻挡网托座、微粒载片及固定环(带有微粒面朝下)安好,旋紧插入枪体中。

  4. 被轰击样品,根据参数距离放入轰击室的合适位置,关好轰击室门。

  5. 打开氦气瓶总阀,顺时针调节气压。一般氦压调节标准高于实验用可裂膜压力200psii=1.379Mpa)

  6. 打开基因枪面板左侧真空泵电源开关。

  7. 将中间气流控制开置于“VAC”位,待真空度达到26英寸汞柱时,快速按下此开关到“HOLD”位。向上压住发射键“FIRE”保持不动,直到轰击为止。

  8. 将中间气流控制开关置于“VENT”位,待真空表回零取出样品。

  9. 把使用过的实验耗材取出来,重复步骤1-8,进行下一个样品的轰击。

三、 关机

  1. 把氦气瓶总阀旋紧,将中间气流控制开置于“VAC”位,待真空度达到15英寸汞柱时,快速按下此开关到“HOLD”位。间歇按压发射键“FIRE”,待氦压表(两个表)指针回零后,逆时针旋转氦压表调节阀至最小,将中间气流控制开关置于“VENT”位。

  2. 关闭基因枪电源、真空泵电源。