王存教授课题组发现钙信号调控植物高锰胁迫的新机制

近日，王存课题组在New Phytologist 在线发表了题为“CBL1/9-CIPK23-NRAMP1 Axis Regulates Manganese Toxicity”的研究论文，揭示了钙信号调控植物高锰胁迫的重要机制。

锰 (Mn) 是植物生长发育的必需微量元素， 但酸性土壤和渍水土壤造成的锰毒害会影响作物的产量和品质。Ca²⁺是真核细胞内广泛存在的第二信使，在植物的生长发育、营养代谢、以及逆境胁迫等过程中均具有举足轻重的作用。该课题组近期研究发现高锰能够激发Ca²⁺信号，激活钙依赖蛋白激酶CPK4/5/6/11磷酸化并激活MTP8，从而增强对锰毒害的耐受能力 (Zhang et al., 2021)。另一类钙感受器CBL2/3-CIPK3/9/26复合体通过磷酸化MTP8抑制其转运活性，与CPK4/5/6/11拮抗调控植物锰稳态，植物借此实现生长和逆境的最佳平衡 (Ju et al., 2022)。此外，该课题组还发现低锰胁迫可以触发与高锰胁迫 (HMnSN) 不同的一种长时间的Ca²⁺信号 (LMnSN)，激活CPK21/23通过磷酸化NRAMP1蛋白的Thr498增强NRAMP1吸收Mn的能力，从而提高对低锰胁迫的耐受性 (Fu et al., 2022)。然而，锰信号转导的转录及转录后调控机制研究在很大程度上还不清楚。

在本研究中，该课题组鉴定了钙感受器CBL1/9及其互作激酶CIPK23形成的复合体正调控拟南芥对锰毒害的耐受能力。研究发现cbl1/9 双突变体与cipk23 突变体均表现出高锰敏感表型。CBL1以及CIPK23过表达转基因植株的高锰胁迫耐受能力显著提高。此外，通过多种体内/外蛋白互作实验发现CIPK23与锰转运蛋白NRAMP1相互作用，且CIPK23磷酸化修饰NRAMP1的第20/22位丝氨酸，通过体内磷酸化实验进一步发现该磷酸化修饰过程受高锰胁迫诱导，磷酸化水平在高锰处理6 h达到最高 (图1)。

图1 CIPK23磷酸化修饰NRAMP1 

此外，NRAMP1融合GFP的亚细胞定位分析实验表明，NRAMP1的内吞作用随高锰处理时间增加逐渐增强。与体内磷酸化结果相对应，内吞作用也在高锰处理6 h达到最高水平，而CBL1/9以及CIPK23的缺失突变与NRAMP1的模拟非磷酸化形式突变 (NRAMP1^S20/22A) 相同，均严重影响了NRAMP1高锰诱导的内吞作用 (图2)。

图2 Ser20/22的磷酸化对NRAMP1的内吞作用至关重要

综上，CBL1/9-CIPK23-NRAMP1信号通路调控拟南芥对高锰毒害的耐受能力。高锰诱导Ca²⁺信号激活CBL1/9-CIPK23复合体，进而磷酸化NRAMP1的第20/22位丝氨酸，从而诱导网格蛋白介导的NRAMP1的内吞作用，以减少其在质膜上的分布，降低植物对锰的吸收，进而增强植物对锰毒害的耐受能力 (图3)。本研究丰富了钙信号调控植物对锰毒害的耐受机制，并为解决酸性土壤锰毒害造成的农业安全生产问题提供了理论基础。张振乾副教授为该论文的第一作者，王存教授为通讯作者，该研究得到了国家自然科学基金委等项目的资助。

图3 Ca2+-CBL1/9-CIPK23-NRAMP1信号途径调控植物高锰胁迫模式图

文章链接：http://doi.org/10.1111/nph.18968